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本公司代理ATCC細胞，提供非洲綠猴腎細胞系/HCV-E2；Vero-HCV-E2費用售前售后一條龍服務，若要獲取詳細的說明書或價格信息，點擊了解更多其它源細胞。
細胞名稱  非洲綠猴腎細胞系/HCV-E2；Vero-HCV-E2費用
形態(tài)特性 上皮樣細胞

生長特性 貼壁生長

特征特性 Vero-HCV-E2細胞整合有丙型肝炎病毒的E2基因，能穩(wěn)定表達E2蛋白，是HCV基礎研究的*摸型。它由武漢大學病毒學國家重點實驗室郭佳博士于2008年構建并保存。

培養(yǎng)條件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS  

傳代方法 1：

3傳代,2-3天傳一代  

傳代情況 C40

凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

非洲綠猴腎細胞系/HCV-E2；Vero-HCV-E2費用在運輸?shù)倪^程中，細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，因此客戶在收到貨以后的*時間是要先觀察產(chǎn)品的狀況，顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時，請不要立即打開培養(yǎng)瓶，應立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱過夜，并于次日在顯微鏡下觀察，此時多數(shù)細胞會重新貼附于瓶壁。如果發(fā)現(xiàn)細胞仍不能貼壁，請試著用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理；如若證實細胞無活力，請在收到貨后48小時內(nèi)將細胞狀態(tài)反饋給我公司，我們將盡快幫助解決。
細胞培養(yǎng)步驟：
一．非洲綠猴腎細胞系/HCV-E2；Vero-HCV-E2費用培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
注意事項：
1.收到非洲綠猴腎細胞系/HCV-E2；Vero-HCV-E2費用后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)絡。
2.收到細胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時（視細胞密度而定）穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收細胞時就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據(jù)。
3.由于細胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐ＷC客戶收到細胞后一周內(nèi)的細胞狀態(tài)，故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明，期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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質量規(guī)格：美國進口Nifedipine（標準品）

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質量規(guī)格：美國進口Nitrazineyellow硝氮黃

質量規(guī)格：美國進口Nifuroxazide硝呋酚酰肼；硝呋奇特

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質量規(guī)格：美國進口NitrovinHCL,Difurazone硝呋烯腙鹽酸鹽

羥基酪醇CAS10597-60-1訂購|咨詢規(guī)格：20mg

二氫槲皮素CAS480-18-2訂購|咨詢規(guī)格：20mg

土鱉對照藥材CAS訂購|咨詢規(guī)格：1g

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DoubleLactoseBileMedium250g雙料乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基

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